本公司無血清培養基的(de)制備技術通(tōng)過改良基礎培養基的(de)現有成分(fēn),篩選并優化(huà)外源補充因子的(de)組合及濃度,應用(yòng)Bottom-UP法即一次一因子法,先篩選适于目的(de)細胞生長(cháng)的(de)基礎培養基,再逐個(gè)檢測外源因子對(duì)細胞生長(cháng)、増殖的(de)影(yǐng)響,留下(xià)對(duì)細胞生長(cháng)及增殖有正 效 應 作 用(yòng) 的(de) 因 子 。篩 選 實 驗 包 括 單 因 素 分(fēn) 析 法 、部 分(fēn) 析 因 設 計 、正 交 實 驗 和(hé) P l a c kett-Burnian設計(PB設計)等。實驗中,根據需要檢測的(de)因素數量選取不同的(de)設計方法。其中,PB設計主要應用(yòng)于培養基組分(fēn)的(de)篩選,通(tōng)過對(duì)實驗模型内的(de)因子取兩水(shuǐ)平進行實驗,比較個(gè)體差異和(hé)整體差異的(de)關系确定關鍵作用(yòng)因子,這(zhè)種設計方法簡單高(gāo)效,能夠避免前期篩選實驗的(de)重複及後期優化(huà)實驗中的(de)資源浪費,是培養基組分(fēn)篩選中優選方法。

        優化(huà)設計是在篩選實驗進行後對(duì)關鍵作用(yòng)因子進行濃度優化(huà)的(de)方法,主要包括最速上升法、響應面設計、全因子實驗等。最速上升法通(tōng)常應用(yòng)于PB設計後,沿著(zhe)響應值上升方向逐步逼近最優區(qū)域。而響應面設計一般将因子數控制在2-3個(gè),利用(yòng)多(duō)元線性方程建模後,分(fēn)析因子的(de)交互作用(yòng),預測達到極大(dà)值所需的(de)條件,以期達到最優效果。響應面分(fēn)析能夠充分(fēn)考慮到各組分(fēn)間的(de)作用(yòng),但是由于響應面設計涉及的(de)因子數目有限,因此我們通(tōng)過連續應用(yòng)最速上升法和(hé)響應面設計進行因子的(de)濃度優化(huà)。

        本公司應用(yòng)成熟的(de)篩選及優化(huà)方法,成功研制多(duō)種化(huà)學成分(fēn)明(míng)确、無異源物(wù)質的(de)無血清培養基,依據培養基技術要求進行生産工藝開發及驗證,建立了(le)完善的(de)無血清培養基生産工藝流程并進行産業化(huà)生産。